Chagatest ELISA lisado WienerLab

Disponibilidad en Chagatest ELISA lisado 

Ensayo inmunoenzimático (ELISA) para la detección de anticuerpos anti-Trypanosoma cruzi.

La enfermedad de Chagas es una infección parasitaria producida por el Trypanosoma cruzi. El diagnóstico de laboratorio depende del estadio en el cual se encuentre la enfermedad. Durante la fase aguda, se efectúa directamente mediante la comprobación de los parásitos en sangre o por métodos inmunológicos que detecten IgM. Durante la fase crónica, se pueden usar métodos inmunológicos como: hemaglutinación, inmunofluorescencia, ensayo inmunoenzimático o Western blot. 

FUNDAMENTOS DEL METODO Chagatest ELISA lisado es un ensayo inmunoenzimático "in vitro" para la detección cualitativa de anticuerpos anti-T. cruzi en muestras de suero o plasma humano. La muestra se diluye en la policubeta, cuyos pocillos se encuentran sensibilizados con antígenos de T. cruzi, correspondientes a zonas altamente conservadas entre distintas cepas. Si la muestra contiene anticuerpos específicos, éstos formarán un complejo con los antígenos y permanecerán unidos a la fase sólida. La fracción no unida se elimina por lavado y luego se agrega el conjugado (anticuerpo monoclonal anti-IgG humana conjugado con peroxidasa), el cual reacciona específicamente con los anticuerpos anti-T. cruzi inmunocapturados. El conjugado no unido se elimina por lavado. La presencia de peroxidasa unida al complejo se revela mediante el agregado del sustrato cromogénico, tetrametilbencidina. Las muestras reactivas desarrollan color celeste. La reacción enzimática se detiene mediante el agregado de ácido sulfúrico, produciendo un viraje del color celeste al amarillo. La densidad óptica se mide en forma bicromática a 450/620-650 nm o a 450 nm. 

REACTIVOS PROVISTOS 

Policubeta sensibilizada: policubeta de tiras removibles, con 96 pocillos recubiertos con antígenos de T. cruzi. 

Diluyente de Muestra: buffer salino con tensioactivo. Color violeta. Conjugado Concentrado: anticuerpo monoclonal anti-IgG humana conjugado con peroxidasa (10x). Color rojo. Diluyente de Conjugado: buffer salino con proteínas. 

Revelador: solución de tetrametilbencidina y peróxido de hidrógeno. Stopper: ácido sulfúrico 2 N. Buffer de Lavado Concentrado: buffer salino con tensioactivo (25x). Color verde. Control Positivo: suero humano inactivado conteniendo anticuerpos anti-T. cruzi. Color naranja.

Control Negativo: suero humano no reactivo inactivado. Color amarillo. 

REACTIVOS NO PROVISTOS Agua destilada o desionizada 

MATERIAL REQUERIDO (no provisto) - Micropipetas para medir los volúmenes indicados - Tips descartables - Material volumétrico para preparar las diluciones indicadas - Estufa a 37o C - Papel absorbente - Guantes descartables - Reloj alarma o cronómetro - Hipoclorito de sodio - Sistema de lavado de policubetas (manual o automático) - Espectrofotómetro para lectura de policubetas

Fuente: 

http://www.wienerlab.com.ar/VademecumDocumentos/Vademecum

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